紫外可見分光光度計按照所吸收光的波長區(qū)域不同，分為紫外分光光度法和可見光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。工作原理是由光源發(fā)出連續(xù)輻射光，經(jīng)單色器按波長大小色散為單色光，單色光照射到吸收池，一部分被樣品溶液吸收，未被吸收的光經(jīng)檢測器的光電管將光強(qiáng)度變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栕兓?，并?jīng)信號顯示系統(tǒng)調(diào)制放大后，顯示或打印出吸光度A（或透射比T），完成測定。

從工作原理可以看出紫外可見分光光度計的五個主要組成部分：光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示系統(tǒng)。

1、光源是提供符合要求的入射光的裝置，紫外可見分光光度計可見光區(qū)常用的光源為鎢燈，紫外光區(qū)常用的光源為氫燈或氘燈。

2、單色器是將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光，并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長的光的光學(xué)裝置，它是光度計的心臟。單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成。其中色散元件是單色器的主要部件。常用的色散元件是棱鏡、光柵，或者是兩者的組合。

3、吸收池是用于盛裝待測液并決定待測溶液透光液層厚度的器皿，又稱比色皿。吸收池一般為長方體，也有圓形或其它形狀的。其底及兩側(cè)為毛玻璃，另兩面為光學(xué)透光面。根據(jù)光學(xué)透光面的材質(zhì)，吸收池又可分為玻璃吸收池和石英吸收池兩種。玻璃吸收池用于可見光區(qū)測定，石英吸收池用于紫外光區(qū)的測定。吸收池的規(guī)格以光程為標(biāo)志。常用的吸收池規(guī)格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。

4、檢測器是將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置。測量吸光度時，并非直接測量透過吸收池的光強(qiáng)度，而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測量，這種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測器，又叫接受器。常用的檢測器有光電池、光電管、光電倍增管及光電二極管陣列檢測器等。光電池價格便宜，但長時間曝光，會使靈敏度降低。光電管的靈敏度比光電池高；光電倍增管不僅靈敏度比普通光電管高，而且響應(yīng)速度快，目前中、高檔分光光度計中一般采用它作為檢測器。光電二極管陣列檢測器是紫外可見分光光度計檢測的一個重要進(jìn)展，代表了最新的發(fā)展水平。

5、信號顯示器是將檢測器輸出的信號放大，并顯示出來的裝置。舊型號的分光光度計多采用檢流計、微安表作顯示裝置，直接讀出吸光度或透光率。新型分光光度計則多采用數(shù)字電壓表等顯示，并用記錄儀直接繪制出吸收（或透射）曲線，并配有計算機(jī)數(shù)據(jù)處理器等。